說說溶酶體染色試劑盒的特點概述
更新時間:2018-05-22 點擊次數:1276
溶酶體染色試劑盒是設計用來標記活細胞的線粒體的,使之帶上不同顏色的熒光。本試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在溶酶體中積累。這種LysoBrite溶酶體指示劑是一種疏水性復合物,可以輕易地滲透進入活細胞中,且當進入細胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性溶酶體指示劑可以在線粒體中保留很長時間,因為該指示劑帶有能定位于細胞的基團。其關鍵特征是其染色效率顯著性提高。 Cell Navigator溶酶體染色試劑盒標記方法十分穩定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細胞術。它也可以用于多種不同類型的研究中,包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究。
溶酶體染色試劑盒細胞化學染色法,SA-βgal在pH6.0時,可將 5-溴-4-氯-3-吲哚基 β-D-吡喃半乳糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoyl β-D-galactopyranoside ,X-gal)水解,產生不溶于水的藍色物質。這種藍色產物相當穩定,固定干燥后避光可保存幾個月。通過計算總群體中藍色細胞的數量,可以很容易地確定SA-β-半乳糖苷酶陽性的細胞比例,即衰老細胞的比例。但是需要注意的是,在所有細胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶(acidic β-galactosidase),在pH4.0時發揮作用。其實SA-βgal發揮作用的zui適pH為4.5,但是在pH4.5時,酸性半乳糖苷酶也會水解底物,因此需要使用SA-βgal次適pH6.0,才能確保藍色產物是由于SA-βgal的作用而產生的。通常我們使用pH為6.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
溶酶體染色試劑盒目前針對溶酶體的定位也主要圍繞酸性磷酸酶展開。經典的溶酶體熒光染色試劑盒(藍/綠/橙/紅色)— 超越LysoTracker!LysoTracker系列溶酶體熒光染料被廣泛應用。然后由于其細胞毒性,LysoTracker在染色幾個小時后便失去檢測效應,更不能隨細胞傳代而持續示蹤染色。另外,LysoTracker的較容易淬滅的光學不穩定性也經常被一些研究者所詬病。 在此,艾美捷特向您推薦由LysoBrite新一代溶酶體專屬熒光染料組成的系列溶酶體熒光染色試劑盒產品。作為新一代熒光染色,LysoBrite具有更低細胞毒性、更亮的熒光強度,和更高的熒光耐淬滅性。