EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點。...
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。(1)盡可能地減少血清凍融次數(shù)。(...
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍...
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失,細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈均一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時細(xì)胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細(xì)胞變成數(shù)個大小不等的有膜...
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細(xì)胞生長,提高生產(chǎn)量。液體培養(yǎng)基接種要注意的事項有哪些:①用酒精棉消毒操作臺面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側(cè),靠近酒精燈放置。將需要進(jìn)行液體轉(zhuǎn)接的試管插在試管架上,置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調(diào)至合適的刻度放于右手附近的架子上...
細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個*的過程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生...
牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA,又稱第五組分...
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